キットは TaqMan ですプローブリアルタイム蛍光 PCR ORF1ab、n遺伝子を定性的に検出する 核 2019-nCoV の酸咽頭スワブ、肺炎の症状が疑われる患者の痰、およびクラスター化 症例
商品番号。:
NRM-FT-400-48支払い:
T/T
【意図 使用】
キットは TaqMan ですプローブリアルタイム蛍光 PCR ORF1ab、n遺伝子を定性的に検出する 核 2019-nCoV の酸咽頭スワブ、肺炎の症状が疑われる患者の痰、およびクラスター化 症例
テスト結果は臨床参照のみであり、 できません 臨床の唯一のベンチマークと見なされます diagnosis.it’s 臨床症状および他の検査結果に関して明白な分析を行うことをお勧めします 結果
演算子 すべき 遺伝子増幅または分子生物学的方法の試験に関する専門的なトレーニングの経験があり、実験室での操作に関連する資格を持っている。研究室は すべき 合理的な生物学的安全予防措置と保護手順を持っている 手順
【 テストの原則 】
このキットでは、プライマーとプローブは、2019-nCoVのnであるORF1abの保存された特定の領域に合わせて設計されています。 それぞれ 蛍光 PCR Nuclear の後にウイルスRNAを検出するために使用されますサンプルの酸精製 RNA。
これ テストキットはリアルタイム蛍光を使用します PCR technology.During PCR 増幅、プローブはテンプレートに結合し、 5'-end プローブのレポーターグループは Taq によって切断されます酵素 (5 '→3' エキソヌクレアーゼ活性)、それにより から 離れる消光基が蛍光 信号を生成します。 リアルタイム増幅曲線は、検出された蛍光シグナルに基づいて自動的にプロットされ、サンプルのct値が計算されます(各反応チューブの蛍光シグナルが設定されたしきい値に達したときに経験したサイクル数)。 FAM 、VICおよびテキサスレッド フルオロフォア utalized マークする ORF1ab 遺伝子、反応中のn個の遺伝子プローブ 溶液 1つのテストを使用して、 2019-nCoV の上記の2つの遺伝子を定性的に検出します。 同時に実行できます。
宛先 偽陰性の結果を回避するために、キットには Cy5 でマークされた内部コントロール(IC)が付属しています。 できた 蛍光基抽出手順と反応を監視するために使用する 解決策
【 メインコンポーネント 】
番号。 | コンポーネント | 材料 | 仕様 |
1 | ヌクレアーゼフリー 水 | DEPC 水 | 1000μL ×1 チューブ |
2 | 核酸 酸 増幅 反応液 | トリス-HCl 、 KCl 、 Mg2 + | 528μL ×1 チューブ |
3 | 逆行する 逆転写酵素 | 逆転写酵素、RNA酵素阻害剤 | 48μL ×1 チューブ |
4 | O / N 反応 解決 | ORF1ab、n genesand 内部対照プライマーおよびプローブ | 288μL ×1 チューブ |
5 | 内部制御 | ヒト遺伝子断片 | 40μL ×1 チューブ |
6 | ポジティブコントロール (O / N) | ORF1ab、nを含む組換えベクター 遺伝子 フラグメント | 400μL ×1 チューブ |
7 | ネガティブコントロール | 生理食塩水 | 400μL ×1 チューブ |
8 | dna ポリメラーゼ | dna ポリメラーゼ | 50μL ×1 チューブ |
注意 1 : さまざまなロットのコンポーネント できません 交換されます。
注意 2 :The テストキット しません 核 を含む酸抽出試薬、使用前に試薬を準備してください。
1. サンプルの取り扱い
10μLを追加 内部統制の へ 200μL 核 を実行するために、それぞれポジティブコントロールとネガティブコントロールの酸 抽出。
2. 試薬 準備:
システム 準備: 取る プリインストール 核酸 フォイルポーチを開いて遠心分離することにより、酸増幅凍結乾燥機を すぐに 各テストのサンプル量 すべき 1つのポジティブコントロールと1つのネガティブコントロールを含む8の倍数である control.add 35μL ヌクレアーゼフリー 水 上 各反応 チューブ
3。サンプル 読み込み中:
5μLを追加 サンプル 核 試験する酸、陽性対照、反応容量全体が40 μL である陰性対照割り当てられた反応で solution.for しません 細かい混合物が必要で、 PCR の蓋を閉めるだけです。反応チューブ、チューブ壁の液体を遠心分離します 上 チューブの底、したがって PCR を処理します 増幅。
検証後、 5μL-10μL の追加が推定されます PCR のパラフィンオイルシステムは PCR に影響を与えません結果ですが、汚染と液体を避けてください 気化